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Bsu DNA聚合酶图片
产品货号:
MT0190
中文名称:
Bsu DNA聚合酶
英文名称:
Bsu DNA Polymerase
产品规格:
500U
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价

Bsu DNA聚合酶是具有链置换活性的DNA恒温扩增聚合酶,主要应用于重组酶聚合酶扩增(RPA)。重组酶UvsX与引物结合形成的蛋白-DNA复合物,能在双链DNA中寻找同源序列;一旦引物定位了同源序列,就会发生链交换反应,Bsu DNA聚合酶启动DNA合成,对模板上的目标区域进行指数式扩增。被替换的DNA链与SSB结合,防止进一步替换。


本Bsu DNA聚合酶来源于嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillus subtilis),系将Bacillus subtilis DNA聚合酶(Bsu) I基因的前296个AA截去而得。该酶保留了Bsu I的5'-3'聚合酶活性,但是缺失了5'-3'核酸外切酶结构域,该酶自身缺失3'-5'核酸外切酶活性,可用于重组酶扩增。




  • 随机引物法标记;
  • cDNA第二条链的合成;
  • 单个dA的加尾;
  • 链置换的DNA合成。



在37℃条件下,30min内参入10nmol酸性不容物定义为1个活性单位。


组分规格
Bsu DNA聚合酶(10U/μL)50μL
10×Bsu Reaction Buffer1mL

保存:-20℃,避免反复冻融,有效期2年。


50mM Tris-HCl(pH8.0),50mM KCl,1mM DTT,37.5% Glycerol。


1×Bsu Reaction Buffer:
50mM NaCl,10mM Tris-HCl(pH7.5),10mM MgCl2,1mM DTT。


75℃加热20分钟。


  • 由于缺乏3'-5'核酸外切酶活性,Bsu DNA聚合酶不能切除3'未配对的突出末端,因而不适用于生成平齐末端。
  • 25℃时Bsu DNA聚合酶保留50%的活性,是同温度下Klenow片段(3'-5'exo-)的两倍。



  • 按照如下体系配制反应:
    成分用量
    Plasmid DNA100ng
    10×Bsu Reaction Buffer5μL
    Random9 (100μM)2μL
    dNTP mixture(10mM)2μL
    RNase-free H2O至50μL

  • 混匀后95℃ 5min,然后冰上放置5min,分别加入不同剂量Bsu DNA聚合酶,分别在25℃和37℃孵育3h,电泳检测各组产物如下图
    Bsu DNA聚合酶,大片段
       泳道1-2:0μL,
       泳道3-4:0.5μL,
       泳道5-6:1μL,
       泳道7-8:2μL,
       泳道9-10:4μL,

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